Анализ мочи тест-полосками - влияющие факторы

[Assandra]

ПРЕАНАЛИТИКА ОАМ: биохимия мочи с использованием «сухой химии».

Периодически на форуме поднимается вопрос качества и достоверности этих исследований. Хочу предложить специалистам форума скромный обзор по интерферирующим факторам. Информация взята из инструкций к тест-полоскам Combina 11S, FAN, Uristik E10, Labstrip U11, справочного пособия «Общеклинические исследования (моча, кал, ликвор, эякулят)», И.И Миронова, Л.А.Романова, В.В.Долгов, Москва, 2005. Мои личные соображения выделены курсивом.

Прежде всего хочу акцентировать, что назначение тест-полосок – предварительный скрининг!

А теперь по тестам.

УРОБИЛИНОГЕНЫ
Тест основан на реакции уробилиногенов со стабилизированной солью диазония в кислой среде с образованием соединений, окрашивающих реагентную зону в цвета от розового до красного. Реакция высокоспецифична для i-уробилиногена и стеркобилиногена. Ход реакции не зависит от рН мочи.
Влияющие факторы:
Ложное занижение результатов: высокие концентрации формальдегидов (дезсредства, моющие средства), длительное хранение мочи на свету (окисление до уробилинов), аскорбиновая к-та (>25-50 мг/дл).
Ложное завышение результатов: прием пациентом лек.веществ (терапевтического или диагностического действия) или продуктов, окрашивающие мочу в красный цвет (свекла, феназопиридин, ПАБК, азокрасители, хлорпромазин, рафапен). Еще непонятное мне в-во Lodine (может и Iodine) данных не нашла.
БИЛИРУБИН
Тест основан на связывании билирубина с солями диазония в сильнокислой среде (реакция азосочетания). Интенсивность розово-коричневого цвета пропорциональна концентрации билирубина. Ход реакции не зависит от рН мочи.
Влияющие факторы:
Ложное занижение результатов: наличие аскорбиновой к-ты (>25-50 мг/дл), нитритов; присутствие большого к-ва индикана может давать атипичную окраску (учитывается как + или – в зависимости от чувствительности фотометра), длительное хранение мочи на свету (билирубин окисляется до биливердина).
Ложное завышение результатов: большое содержание уробилиногенов (>60 мг/л или 100 мкмоль/л), прием пациентом лек.веществ – см.уробилиноген.
КЕТОНЫ (ацетон, ацетоуксусная кислота)
В результате реакции с нитропруссидом натрия в щелочной среде образуется розово-фиолетовый окрашенный комплекс. Реакция более чувствительна к определению АУК, бета-гидроксимасляная к-та не реагирует.
Влияющие факторы:
Ложное занижение результатов: не известны.
Ложное завышение результатов: фенилкетоны в высокой концентрации дают атипичную (более оранжевую) окраску, что может учитываться как + или – в зависимости от чувствительности фотометра. Фталеин-содержащие вещества (напр., диагностикумы, наркотики) и производные антрахинона (часто входят в состав БАДов, напр. – ДЕТОКС), прием пациентом каптоприла, меркаптоэтансульфоната натрия (МЕСНА), леводопы.

Буду рада любым комментариям и дополнениям.

Продолжение будет.

[Assandra]

ГЛЮКОЗА
Энзиматическая двухэтапная реакция окисления D-глюкозы с использованием глюкозоксидазы и пероксидазы. Промежуточный продукт реакции – перекись водорода.
Влияющие факторы:
Ложное занижение результатов: высокое содержание аскорбиновой к-ты ингибирует реакцию при небольших концентрациях глюкозы (до 250 мг/дл), подавление реакции происходит также при наличии гентизиновой к-ты (метаболит аспирина и салицилатов, ряда антибиотиков, часто входит в состав БАДов), рН ниже 5,0, высоком удельном весе.
Ложное завышение результатов: контаминация дезсредствами и моющими веществами, содержащими перекись водорода, а также пероксидазы (например, моча собрана в плохо вымытую баночку из-под хрена )
БЕЛОК
Тест основан на принципе «белковой ошибки» индикатора.Реактивная зона содержит кислый буфер и тетрабромфеноловый синий (кислотно-основный индикатор). При наличии белка в моче протоны, высвобождающиеся из индикатора в кислой среде, переносятся на белок, цвет индикатора из-за недостатка протонов меняется с желтого через зеленый на синий. Тест особенно чувствителен к присутствию альбумина (0,1 г/л) и трансферина (0,2 г/л), остальные белки определяются с меньшей чувствительностью.
Влияющие факторы:
Ложное занижение результатов: контаминация анионными и неионными веществами. Плохо выявляются глобулины, мукопротеины, белок Бенс-Джонса.
Ложное завышение результатов: высокий удельный вес, прием пациентом лекарственных препаратов, содержащих хинин, хинолин, наркотические в-ва, инфузии поливинилпирролидона; попадание в мочу моющих средств на основе четвертичного аммония, а также содержащие хлоргексидин; сильно щелочная моча (рН более 8-9), высокая буферная емкость мочи. Подкисление мочи до рН 5-6 решает проблему.

[Assandra]

КРОВЬ
Тест основан на псевдопероксидазной активности гемоглобина и миоглобина, которые катализируют окисление индикатора (хромогена) стабилизированным органическим гидропероксидом с образованием зеленого окрашивания. Минимальная чувствительность – к-во гемоглобина из 10 гемолизированных эритроцитов или 5 эритроцитов в 1 мкл нецентрифугированной мочи. Это не позволяет выявить микрогематурию (по методу Нечипоренко это 1000 эритроцитов в 1 мл нецентрифугированной мочи, что соответствует 1 эритроциту в 1 мкл). Метод не позволяет различить гемоглобинурию и миоглобинурию.
Влияющие факторы:
Ложное занижение результатов: высокое содержание аскорбиновой к-ты, гентизиновой к-ты, мочевой к-ты, глутатиона, высокий удельный вес.
Ложное завышение результатов: контаминация дезсредствами и моющими веществами, содержащими перекись водорода, гипохлорит; экзогенные пероксидазы, формалин; активность бактериальных оксидаз при ИМВП.

ЛЕЙКОЦИТЫ
Тестовое поле содержит эфир индоксила и соли диазония. Эстераза гранулоцитов расщепляет эфир индоксила, в результате чего свободный индоксил может реагировать с солями диазония и давать фиолетовое окрашивание.
Влияющие факторы:
Ложное занижение результатов: наличие глюкозы (более 160 ммоль/л), оксолиновой кислоты в высоких концентрациях, прием пациентом цефалексина, гентамицина, тетрациклина, цефалотина. Тест-полоски не выявляют лимфоциты.
Ложное завышение результатов: ярко окрашенная моча (билирубин, нитрофурантоин, употребление свеклы), загрязнение мочи вагинальным секретом, остатками дезсредств, присутствие формалина, сильно-щелочная реакция (рН 8.5-10), высокий удельный вес.

НИТРИТЫ
Нитраты мочи под действием ферментов в основном грамотрицательных (E.coli, Proteus, Klebsiela, Citrobacter и пр.) бактерий превращаются в нитриты. Цветная реакция на нитриты основана на модифицированной реакции Грисса. Интенсивность окрашивания тестового поля не пропорциональна концентрации бактерий, чувствительность реакции – более 100000 микробных тел в мл мочи. Количество нитритов в моче зависит не только от количества микроорганизмов, но и от их вида, длительности воздействия на мочу (в связи с этим наиболее информативна первая утренняя порция мочи), от исходного содержания нитратов (накануне исследования рекомендуют есть достаточное количество овощей). Отрицательный результат не исключает бактериурию.
Влияющие факторы:
Ложно отрицательный результат: исследование на фоне или сразу после а/б терапии, высокий удельный вес мочи, концентрация аскорбиновой кислоты более 40 мг/дл, моча содержит бактерии, не превращающие нитраты в нитриты (напр., стрептококки, стафилококки, гонококки, энтерококки, микобактерии туберкулеза), моча находилась в мочевом пузыре недостаточно долго (менее 4 часов), низкое поступление или отсутствие нитратов в пище (напр., новорожденные и дети на ГВ), высокий диурез (диуретики, обильное питье накануне исследования).
Ложно положительный результат: вторичное бактериальное загрязнение длительно хранившейся мочи, ярко окрашенная моча (производные пиридина, свекла).

[Assandra]

ОТНОСИТЕЛЬНАЯ ПЛОТНОСТЬ
Тест основан на методе ионного обмена, который происходит между полиэлектролитом тестовой зоны и ионами мочи. Метод не дает количественной оценки недиссоциирующих составляющих мочи (глюкоза, мочевина, креатинин), а значит, не чувствителен к изменениям удельного веса при изменении концентраций этих вещест, например, при глюкозурии. Тест оптимизирован для рН=6,0.
Влияющие факторы:
Ложное занижение результатов: нейтральная и щелочная реакция мочи (рН выше 6,5)
Ложное завышение результатов: аскорбиновая кислота в концентрации более 70 мг/дл, кислая реакция мочи (рН ниже 6,0), повышенное содержание белка (более 1,5 г/л).

Учитывая хитрый метод измерения относительной плотности по концентрации исключительно диссоциирующих на ионы ингредиентов мочи, имеет смысл перепроверять её урометром при наличии солей, глюкозы, белка, при несоответствии насыщенности цвета мочи ожидаемым значениям плотности.

рН
Тут, к счастью, отличий от общепринятого индикаторного метода нет. Но. Загрязнение моющими и дезсредствами посуды для мочи, естественно, сдвигает рН в ту или другую сторону.

АСКОРБИНОВАЯ КИСЛОТА
Как следует из вышеизложенного, данное исследование скорее необходимо для оценки достоверности других тестов, использующих методы «сухой химии», нежели для оценки «витаминного статуса» пациента. Тест не обладает достаточной специфичностью и реагирует не только на аскорбиновую кислоту, но и на другие сильные восстановители (метаболиты аспирина, гентизиновая кислота и др.), однако их интерференция аналогична аскорбинке, поэтому для оценки достоверности определения глюкозы, эритроцитов, нитритов, билирубина, уробилиногена, гемоглобина он вполне пригоден.

При положительной реакции на аскорбиновую кислоту исследование необходимо повторить не ранее чем через 10 часов после последнего употребления витамина С (препараты, фрукты, овощи).

Таким образом, кажущиеся простота и элементарность исследования мочи тест-полосками таят в себе вероятность разнообразных ошибок.