Креатинкиназа МВ

[ClinlabSamara]

Иногда сталкиваюсь с проблемой определения активности МВ фракции креатинкиназы у некоторых пациентов (метод с иммуноингибированием). Примерно в одном случае из 1000 активность МВ КК превышает активность общей КК в несколько раз - например: общая креатинкиназа 140 Е/л МВ-фракция 460 Е/л. При определении масс МВ фракции - как правило в норме. Толком по этой проблеме ничего не нашел. Кто-нибудь сталкивался с подобной проблемой?

[Dr.Vad]

данный феномен описывают в недавней публикации:

Clinically effective CK-MB reporting: How to do it?
J Postgrad Med. 2010 Jul-Sep;56(3):226-8.
[Ссылки доступны только зарегистрированным пользователям ]

[denson]

Сообщение от Dr.Vad

данный феномен описывают в недавней публикации:

Как я понял, проблема несколько иная. Одно дело, когда понять, почему повышена МВ фракция, а другое, почему МВ больше, чем общая аж в 4 раза.

Набор на определение МВ фракции работает же так: антителами мы убираем М субъединицу, определяем активность В, и результат о умножаем на 2. Если, допустим у пациента резко повышена ВВ фракция (повреждение мозга), то мы увидим рост результатов в тесте на СК-МВ, но общая СК тоже будет высокой. (этим, кстати, пользуются неонатологи).

Если бы мы видели, что МВ фракция больше общей в пределах двукратного увеличения, можно было думать, что-то происходит с антителами набора на МВ (HAMA те же самые). Но в 4 раза...

[Dr.Vad]

не скажу за "4 раза против 2 раз", но подобная картина с измерением ЦК-МБ описывается здесь:

Some patients even had a normal total CK with the CK-MB activity value greater than the total CK activity...
---
Anomalous Activity Measurements of Creatine (Phospho) Kinase, CK-MB Isoenzyme in Indian Patients in the Diagnosis of Acute Coronary Syndrome

[Ссылки доступны только зарегистрированным пользователям ]

[denson]

Еще раз при спокойном размышлении. Наборы на СК и СК-МВ - они совершенно идентичные. Единственное отличие - это наличие в реактиве №1 набора на СК-МВ антител к М фракции. Предположим, что из-за наличия чего-то в образце или по каким-то другим причинам все антитела "покоцались" и набор определяет общую фракцию СК. Тогда по-идее он должен выдать результат СК-МВ = 2хСК. Если выше, то возможно, что проблемы в калибровке и высокие значения завышаются. Но боюсь, нет контроля с 400 ЕД для СК-МВ, чтобы это проверить.

Можно еще форез провести этих образцов - что там всплывет.

Ну а практически автор сделал все правильно - переставил образцы с определением массовой концентрации.

[ClinlabSamara]

Сообщение от denson

Наборы на СК и СК-МВ - они совершенно идентичные. Единственное отличие - это наличие в реактиве №1 набора на СК-МВ антител к М фракции.

В нашем случае идентичен реактив 1 на CK и CKMB, а во 2-м как раз антитела.
R1 Imidazole buffer: 123 mmol/L, pH 6.5 (37 °C); EDTA:
2.46 mmol/L; Mg2+: 12.3 mmol/L; ADP: 2.46 mmol/L; AMP:
6.14 mmol/L; diadenosine pentaphosphate: 19 μmol/L; NADP
(yeast): 2.46 mmol/L; N-acetylcysteine: 24.6 mmol/L; HK
(yeast): ≥ 36.7 μkat/L (25 °C); G6P-DH (E. coli): ≥ 23.4 μkat/L
(25 °C); preservative; stabilizer; additive.

R2 CAPSOa buffer: 20 mmol/L, pH 8.8 (37 °C); glucose: 120 mmol/L;
Mg2+: 11 mmol/L; EDTA: 2.46 mmol/L; creatine phosphate:
184 mmol/L; 4 monoclonal anti-CK-M antibodies (mouse),
inhibiting capacity: > 99.6 % up to 66.8 μkat/L (4000 U/L) (37 °C)
CK-M subunit; preservative; stabilizer; additive.

[ClinlabSamara]

Выкладываю графики реакций - первые 2 изображения - СКМВ>СК

[Assandra]

R2 CAPSOa buffer: 20 mmol/L, pH 8.8 (37 °C); glucose: 120 mmol/L;
Mg2+: 11 mmol/L; EDTA: 2.46 mmol/L; creatine phosphate:
184 mmol/L; 4 monoclonal anti-CK-M antibodies (mouse),inhibiting capacity: > 99.6 % up to 66.8 μkat/L (4000 U/L) (37 °C)
CK-M subunit; preservative; stabilizer; additive.

Версия в порядке бреда.
HAMA-антитела?

[AlexT]

Еще информация:

[Ссылки доступны только зарегистрированным пользователям ]
Creatine kinase MB (CKMB) values, which exceed 50% of the total CK, probably reflect unusual beta-subunit synthesis since the heart muscle rarely exceeds 30% CKMB.

The newer sandwich assays for CKMB have eliminated the confusion seen with older methodologies, but may result in the inability to detect some infrequent contributions to total CK (eg, macro and mitochondrial forms).

In patients receiving treatment with high biotin doses (>5 mg/day) there should be an interval of at least 8 hours between the last biotin administration and the collection of the specimen as biotin interferes with the assay.


[Ссылки доступны только зарегистрированным пользователям ]

Rarely, under certain pathological conditions, abnormally increased
CK-BB may contribute to the falsely elevated CK-MB activity that may exceed total CK activity. Jap et al reported a patient with rectal adenocarcinoma and an extremely high CK-MB activity greater than the total CK level, in which the etiology was attributed to a marked elevated immunoglobulin-bound CK-BB complex (macro CK type 1) that was caused by the rectal cancer.

[Ссылки доступны только зарегистрированным пользователям ]
An 82-year-old man presented with left chest pain and was found to have an elevated creatine kinase MB (CK-MB) value greatly exceeding the total creatine kinase (CK) activity. Subsequent electrophoresis showed that creatine kinase MM (CK-MM) accounted for 100% of the total CK activity. Eventually, the patient was diagnosed with prostatic adenocarcinoma (stage D)

[denson]

Кстати, просьба к автору топика. У вас есть графики кривой реакции - как она выглядит? Ну и для сравнения как выглядит нормальная реакция.

[ClinlabSamara]

Сообщение от denson

Кстати, просьба к автору топика. У вас есть графики кривой реакции - как она выглядит? Ну и для сравнения как выглядит нормальная реакция.

Графики есть, на следующей неделе выложу. Повторюсь, что подобная ситуация возникает очень редко, раз в 2-3 месяца попадается такой пациент - сколько бы не измеряли активность КК-МВ у него - результат всегда будет такой, причем иногда они повторно поступают к нам - через несколько месяцев или через год - наблюдаем ту же картину.
Контроля высоких значений в самом деле у нас нет (говорят, не сертифицирован у нас, это так?). Однажды попали к нам два лота "нормального" контроля со средней 140 Е/л, использовали их как патологический.

[Dr.Vad]

нашел вот такую экспериментальную публикацию, где оцениваются различные тест системы для CK-MB и общей CK: в таблице 1 - как аденилат-киназа и своб. фракция CK-BB может повышать (включая разы) CK-MB активность против общей СК активности, в таблице 2 - как макрофракция CK-BB может делать тоже самое...

Clin Chem. 1982 Jan;28(1):166-9.
Immunoinhibition and automated column chromatography compared for assay of creatine kinase isoenzyme MB in serum.
[Ссылки доступны только зарегистрированным пользователям ]

[denson]

Чисто для общей информированности. Анализатор вносит в кювету сначала реактив 1 и потом образец или наоборот?
Ну так то кривые выглядят не подозрительно. Я так понял, никаких аномальных флагов анализатор не выставил.
Эх хорошая мысля как всегда пришла опосля . А если сравнить кривые общей СК и СК-МВ в одном "нормальном" образце и в одном "аномальном"?

[ClinlabSamara]

Сообщение от denson

Чисто для общей информированности. Анализатор вносит в кювету сначала реактив 1 и потом образец или наоборот?
Ну так то кривые выглядят не подозрительно. Я так понял, никаких аномальных флагов анализатор не выставил.
Эх хорошая мысля как всегда пришла опосля . А если сравнить кривые общей СК и СК-МВ в одном "нормальном" образце и в одном "аномальном"?

Анализатор вносит сначала реактив 1, затем разводит его водой. Потом образец и так же разводит его водой. На другом анализаторе - та же схема, но без добавления воды - результаты те же.
Никаких флагов)
Можно попробовать сравнить и так, немного образца еще осталось в морозилке.

[denson]

Не. Я имел вииду, что вы выложили результаты только СК-МВ, а можете от тех же самых образцов выложить еще и общую СК? Если мое предположение верно, то кривые в нормальном образце будут разные, а в аномальном одинаковые. А если в аномальном СК-МВ кинетика будет "круче", то опять надо будет мозгом скрипеть.

Статью, которую Вадим Валерьевич здесь выложил,

Clin Chem. 1982 Jan;28(1):166-9.
Immunoinhibition and automated column chromatography compared for assay of creatine kinase isoenzyme MB in serum.
[Ссылки доступны только зарегистрированным пользователям ]

я прочитал, но мне все равно непонятно как ее интерпретировать - там наборы от разных производителей и что из себя представляет мерковский набор, которым делали СК-МВ непонятно. Я пока хоть убейте не могу себе представить механизма гиперактивности МВ фракции, если используются наборы одного производителя.